3.
Успешно разведен таиландский мастацембелус с использованием двукратной инъекции. При предварительном инъецировании самкам вводили в мышцы спины по 200 ЕД хориогонического гонадотропина, самцам — по 50 ЕД.
При разрешающей инъекции доза соответственно 0, 6 и 0, 3 мг гипофиза в 0,1 мл суспензии. Через 3 ч после разрешающей инъекции для дополнительной стимуляции нереста следует увеличить подачу воздуха в аквариум. Через 3 ч после этого начинаются бурные брачные игры — рыбы буквально свиваются в клубок, после чего начинается икрометание.
Успех при разведении с применением гонадотропных инъекций во многом зависит от того, насколько производители готовы к нересту и насколько удачно подобрана доза инъецируемого гормона. Примером неудачного нереста может служить опыт разведения цихлиды «павлиний глаз». Производителям было введено в мышцу спины: самцу — 400 ИЕ, самке — 200 ИЕ гонадотропного гормона хорио-гонина. Нерест начался через 1, 5 ч. К сожалению, икра после нереста побелела.
Анестезирующие вещества применяют в двух случаях; для кратковременного обездвиживания рыб на 1–5 мин, с целью пересадки из одной емкости в другую или для проведения инъекционных работ, а также искусственного получения половых продуктов; для длительного снижения активности рыб (на несколько часов) при их перевозке.
При действии малых доз анестетика рыбы через несколько минут сначала становятся малоподвижными, далее ложатся на дно или всплывают, продолжая дыхательные движения жабрами. При передозировке у рыб прекращаются движения жаберных крышек, и они могут погибнуть. Обычно при одной и той же концентрации анестетика при более высокой температуре его действие более эффективно, чем при более низкой. Прекращение наркоза осуществляется пересадкой рыб в свежую воду. При этом температура ее должна быть на 1–5 °C ниже той, которая была при наркозе. Рыбы с разной видовой активностью и разных размеров требуют различных концентраций анестетика.
Растворы анестетиков обычно хранят не более трех дней. Для кратковременной наркотизации используют следующие анестетики в соответствующих концентрациях: амилен-гидрат (7—13 г/л), гидрохлорид-2-метил-4-винилоксихинолин (10–20 мл/л), комбелен (0,1–0,2 мл/л), метилпентанол (0,5–1 мл/л), метилпаратимол (2–4 мл/л), бикарбонат натрия (0,4–0,6 г/л), пропоксат (3–4 мл/л), пропоксимол (0,05— 0,4 мл/л), третичный амиловый спирт (0,25—0,5 мл/л), третичный бутиловый спирт (0,3–3,5 мл/л), трибромэтанол (5—50 мл/л), трикаин-метансульфонат (MS-222) (0,13— 0,26 г/л), трихлорбутанол (0,25—0,4 г/л), СО2 (0,2–0,4 г/л), хинальдин (5—12 мг/л), хинальдин-гидрохлорид (25 мг/л), хлоралгидрат (20–30 г/л), хлорэтон (0,2–0,4 г/л), эвгенол (100 мг/л), серный эфир (17,2 мг/л), уретан (0,5–1 мг/л).
Для приготовления раствора хильнальдина 0,1 мл его маслянистой жидкости растворяют в 1–2 мл этилового спирта или ацетона, после чего смесь выливают в емкость с 4,5–6 л воды.
Продолжительность нахождения рыбы в растворе хинальдина не должна превышать 10 мин.
При перевозке рыбы на небольшие расстояния в качестве анестетика используют: для морских рыб — амобарбитал в концентрации 105–130 мг/л, для пресноводных рыб— амиленгидрат (0, 5–1, 25 мл/л), хлоралгидрат (2,3–3,1 г/л) или трикаин-метансульфонат (MS-222) (10–25 мг/л). Реакцию воды стабилизируют бикарбонатом натрия (150 мг/л). Плотность посадки рыбы при наркотизации можно увеличить в 2–3 раза относительно нормы.
Хорошие результаты при перевозке рыб в течение 6–8 ч дает использование смеси анестетиков: менокаина и хинальдина по 10 мг/л. Эта смесь обладает малой размерной и видовой специфичностью действия и может использоваться для перевозки как пресноводных, так и морских рыб.
Обесклеивание икры обычно осуществляют при инкубации ее в аппаратах Вейса или их аналогах (перевернутых бутылках без донышка, где икра инкубируется за счет подачи воды снизу через горлышко). Обычно таким образом инкубируют большие количества икры золотой рыбки, орфы, цветного карпа-кои.
Оболочка клейкой икры состоит из двух слоев: жесткого, внутреннего, — первичная оболочка (Zona radiata) и наружного, клейкого, — хориона (chorion). Обесклеивание осуществляется двумя способами: разрушением наружного слоя и опудриванием клейкого хориона.
Для растворения яйцевой оболочки используют 1 %-ный раствор трипсина, приготовленный на фосфатном буфере с рН 7,4–7,5. Икру выдерживают в этом растворе несколько минут до потери клейкости и промывают водой. Можно для этих же целей использовать 1 %-ный раствор проназы.
Хорошо растворяется клейкий слой икры при выдерживании в растворе гиалуронидазы, ферменте сперматозоидов, за счет которого они растворяют оболочку яйцеклетки млекопитающих и оплодотворяют ее. Гиалуронидазу можно получить, провернув через мясорубку семенники и проэкстрагировав этот фермент физиологическим раствором. Фермент гиалуронидаза является действующим началом препарата ПАС «Г» (порошкообразные ацетонированные семенники «говяжьи»). Из этого препарата готовят маточный раствор: 5 г раствора настаивают при комнатной температуре не менее 3 ч в 10 мл стерильного физиологического раствора (6–9 г NaCl на 1 л/воды). Маточный раствор ПАС «Г» можно хранить в холодильнике 5–7 суток. Для обесклеивания этот раствор разбавляют в 10 раз водой.
Можно обесклеивать икру раствором в составе: 1 г NaCl и 3 г химически чистой мочевины на 1 л воды. После обесклеивания икру обрабатывают в растворе танина (0,1–1,6 г/л).
Опудривание клейкого слоя икры осуществляют, промывая ее водой с илом, крахмалом или тальком. Часто для обесклеивания достаточно бывает промыть икру 1 %-ным раствором поваренной соли.
Хорошие результаты дает обесклеивание молоком, разбавленным в 10–20 раз водой. Икру орфы и золотой рыбки обесклеивают в этом растворе в течение 1 ч, постоянно перемешивая куриными перьями или барботируя воздухом. Если на 1 л раствора добавить 3 г поваренной соли, икра лучше набухает, становится прочнее на раздавливание и при инкубации в обычной пресной воде дает значительно меньший отход.
При инкубации икры воду в нерестовике дезинфицируют, добавляя в нее в концентрации 0, 5–2 мг/л метиленового синего, риванола, малахитового зеленого, фиолетового К, оксалата ярко-зеленого, трипафлавина или эрициклина. При наличии в нерестовике растений концентрацию метиленового синего увеличивают, так как основная его часть уходит из воды в растение.
Препараты, повышающие темпы роста молоди и выживаемость икры и личинок рыб. Для повышения выживаемости икры в процессе ее инкубации, а также личинок и мальков в процессе их подращивания, особенно в условиях, отличных от оптимальных, в последние годы применяют препарат даларгин. Одновременно даларгин ускоряет темп роста молоди рыб.
На достижение срока половой зрелости и воспроизводительную способность рыб этот препарат не влияет.
Даларгин — синтетический суперактивный аналог лейэнкефалина, представляет собой белый мелкокристаллический порошок, легкорастворимый в воде. Промышленностью выпускается в виде порошка в ампулах по 1 мг для внутривенного или внутримышечного введения людям с целью усиления регенерации поврежденных тканей.
Маточный раствор даларгина готовят, растворяя 1 мг его в 1 л стерильной дистиллированной воды. Стерильный водный раствор даларгина может храниться в холодильнике при 4 °C несколько лет. В момент нереста рыб одноразово добавляют 1 мл маточного раствора даларгина на 1 л воды нерестовика. Полезно добавлять его в той же концентрации к личинкам сразу после выхода их из оболочек икры (до перехода на плав).
Для увеличения численности и величины потомства в корм производителям добавляют телячью вилочковую железу.
Кормление рыб щитовидной железой ускоряет их метаморфоз, но замедляет рост.
Заметно ускорить темп роста рыб можно с помощью внутримышечных инъекций: бычьего гормона роста (10 мг/кг, ежедневно), бычьего инсулина (0, 3—10 МЕ/кг ежедневно), 4-хлоротестостеронацетата (по 0, 5 мг/кг каждые 4-е сутки), тестостеронпропионата (по 10 мг/кг каждые 4-е сутки), метиландростендиона (по 4 мг/кг каждые 4-е сутки); тиреоидина (10 мг/кг).
Более удобно гормональные препараты роста вводить в корм в концентрации, мг/кг корма: этилэстрол (2,5), диметазин (5),17-метилтестостерон (1–2),17-этинилтестостерон (2,5–3,5), метиландростендион (7,8), метиландростерон (15), андростендион (500), тестостеронпропионат (560), андростерон (580), дегидроэпиандростерон (3,22 г/кг), тестостерон (10 мг/кг),11-кетотестостерон (10), оксиметолон (10), станазол (833),1-дегидростеронацетат (15), тиреоид быка (20), тиреоид сухой (6), трийодтиронин (20), крезацин (10–20), тиреоидин (60 мг/кг), При добавлении тиреоидина непосредственно в воду его концентрация, ускоряющая рост, равна 0,1—10 мг на 1 л воды.
Усилить в 5 раз выделение эпителиального слизистого секрета у дискусов, незаменимого корма для их молоди, можно за счет инъекций рыбам пролактина и соматотропина.
Усиление окраски рыб. Усилить красные тона окраски рыб можно введением в корма лепестков календулы, лилий, одуванчика, экстракта жира из красного перца, крилевой муки. Инъекция иохимбина (растительного алкалоида) вызывает появление брачного наряда, например у горчака.
Биологически активные вещества. В селекционной работе обычно используют три этапа: получение разнообразия в потомстве, отбор особей с интересующими признаками и закрепление признаков в потомстве.
Для получения максимально большого разнообразия в потомстве применяют мутагенные вещества: этиленимин, эфиры сульфоновой кислоты, гидроксиламин, диметилсульфат (0,11—0,13 mM), нитрозоалкилмочевину, нитрозоэтилмочевину, нитрозометилмочевину (0, 97—9, 7 mM). Четкого генетического эффекта можно достичь при обработке мутагенами спермы холодноводных рыб в течение 1 ч, а тепловодных — в течение 30 мин.
При отборе удачных вариантов приходится иметь дело с признаками, сцепленными с полом. В таких случаях часто приходится прибегать к реверсии пола, то есть к изменению пола на противоположный. Получить 100 % самцов можно при| внесении в корм самкам от 30 до 100 мг на 1 кг корма метилтестостерона или этинилтестостерона, а 100 % самок можно получить при скармливании самцам или малькам 20 мг эстрадиола или 50 мг этинилэстрадиола на 1 кг корма. Для получения реверсии пола кормление с применением этих препаратов осуществляют, в течение месяца.